微生物同定の基礎知識と検査のポイント

菌の保存法、迅速同定法など、基礎から実務の活用法を習得する！

第Ⅰ講　微生物学の基礎

１.微生物の誕生
 1-1.地球の誕生と生命の誕生前夜
 1-2.生命の誕生
 1-3.細菌の誕生
 1-4.古細菌と真正細菌
 1-5.微生物の分類
　 1-5-1.生物界における微生物の位置
　 1-5-2.原核生物と真核生物
　 1-5-3.微生物の分類
　 1-5-4.従属栄養細菌と独立栄養細菌
　 1-5-5.好気性細菌と嫌気性細菌
 1-6.微生物の構造
　1-6-1.微生物の大きさ
　1-6-2.細菌の形態
　　(1) 球菌Coccus, Cocci：
　　(2) 桿菌Bacillus, Bacilli, Rod, Rods:
　　(3) らせん菌Spirillum, Spirilla
　1-6-3.細菌の構造
    (1) 細胞壁Cell wall
    (2) 細胞膜Cell membrane
    (3) 細胞質Cytoplasma
    (4) 核様体Nucleoid
    (5) 莢膜Capsule、粘液層Slime layer
    (6) 鞭毛Flagella,
    (7) 線毛Pili
    (8) 芽胞Spore, Endospore
２.微生物実験の基本操作
 2-1.滅菌と消毒とは
 2-2.滅菌法
  2-2-1.乾熱滅菌
  2-2-2.高圧蒸気滅菌（オートクレーブ）
  2-2-3.紫外線照射Ultra Violet Irradiation
  2-2-4.ガンマ線照射γirradiation
  2-2-5.ろ過滅菌Filtration
 2-3.消毒剤
 2-4.ガス滅菌
  2-4-1.酸化エチレンガス（EO）
  2-4-2.過酸化水素低温ガスプラズマ滅菌
 2-5.滅菌器の性能試験
 2-6.手指の消毒薬の調製
３.培地の種類とその特徴
 3-1.培地の形状
 3-2.目的による分類
    (1) 一般細菌増菌培地
    (2) 分離（選択）培地
    (3) 確認培地
    (4) 保存培地
 3-3.培地の選択と調整
４.培養に使用する培地の調整法
 4-1.予め準備するもの
 4-2.作製法
 4-3.滅菌した培地の無菌分注
　　　

第２講：顕微鏡標本の作成法、分離・培養検査法、同定検査法

１.顕微鏡標本の作成法
 1-1.染色の必要性と問題点
 1-2.細菌の染色
  1-2-1.種々の染色法
  1-2-2.グラム染色の機序
  1-2-3.グラム染色法
  1-2-4.その他の染色法
 1-3.細菌観察法
  1-3-1.顕微鏡の種類
  1-3-2.光学顕微鏡の構造と機能
  1-3-3.油浸レンズを使用した光学顕微鏡の操作
２.分離・培養検査法
 2-1.分離培養の必要性
  2-1-1.検体の選び方
  2-1-2.検査材料の塗抹に用いる器具
    (1) 白金耳、白金線
 2-2.無菌操作法
  2-2-1.無菌操作の必要性
  2-2-2.使用器具の火炎滅菌法
  2-2-3.検査材料、集落の三段階希釈法
３.同定検査法
 3-1.細菌の培養の基礎知識
  3-1-1.細菌の培養に用いる種々の培地
  3-1-2.細菌の培養環境
 3-2.細菌集落
  3-2-1.細菌集落の出現について
  3-2-2.細菌集落の肉眼的観察法
  3-2-3.細菌集落と細菌培地の色調変化の意味
 3-3.細菌同定法
    (1) 好気性・通性嫌気性グラム陽性球菌の同定法
    (2) 好気性・通性嫌気性グラム陽性桿菌の同定法
    (3) 好気性・通性嫌気性グラム陰性桿菌の同定法
    (4) グラム陽性菌と陰性菌の簡便検査法
 3-4.細菌性状の検査法
  3-4-1.生化学的検査法
    (1) 生化学試験用確認培地
    (2) 確認培地への接種法
    (3) 確認培地での結果判定法
  3-4-2.検査キットを用いた迅速診断法
  3-4-3.血清学的・免疫学的検査法
    (1) 細菌抗原の血清反応
    (2) 細菌の特殊な免疫試験法
 3-5.細菌の遺伝子検査法
  3-5-1.遺伝子検査法の種類と原理、長所と短所
  3-5-2.DNA配列の検出
    (1) 遺伝子増幅法（Polymerase-chain reaction：PCR）
    (2) その他の遺伝子検出法
 

第３講：菌量測定法、菌株保存法、細菌検査の現場で必要となる病原細菌の知識

１.菌量測定法
 1-1.微生物の定量法と問題点
 1-2.微生物定量法の実際
  1-2-1.血球計算板
  1-2-2.コールター・カウンター
  1-2-3.迅速定量法
  1-2-4.細菌の増殖曲線
  1-2-5.生菌数の定量
  1-2-6.微量希釈・塗抹培養法
２.菌株保存法
 2-1.菌株保存の目的
  2-1-2.菌株保存法の実際
   (1) 凍結保存法
   (2) 凍結乾燥法
 2-2.菌株保存に用いる機器
  (1) 超低温槽
  (2) 凍結乾燥機、-196℃液体窒素凍結保存容器
 2-3.世界の菌株保存
  2-3-1.菌株保存の意義
  2-3-2.世界の菌株保存機関
３.細菌検査の現場で必要となる病原細菌の知識
 3-1.環境中に生息する細菌
  (1) 生きているが培養できない（Viable but not culturable：VBNC）細菌
  (2) クオラム・センシング（Quorum sensing）
 3-2.ヒトの正常細菌叢
 3-3.細菌の分類について
  3-3-1.グラム染色性と細菌細胞壁の構造
 3-4.グラム陽性菌とその特徴
  3-4-1.好気性・通性嫌気性グラム陽性球菌
    (1) ブドウ球菌
    (2) レンサ球菌
    (3) 腸球菌
  3-4-2.好気性・通性嫌気性グラム陽性桿菌
    (1) リステリア
    (2) 結核菌とその類縁菌
    (3) 多剤耐性結核菌
  3-4-3.偏性嫌気性グラム陽性桿菌
  3-4-4.芽胞形成グラム陽性桿菌
    (1) バチラス属
         ・炭疽菌
         ・セレウス菌
    (2) クロストリジウム属とその外毒素
         ・ガス壊疽菌
         ・破傷風菌
         ・ボツリヌス菌
 3-5.グラム陰性菌とその特徴
　3-5-1.腸管内の細菌と腸内細菌科
    (1) 大腸菌
    (2) サルモネラ
    (3) その他の腸内細菌科の細菌
  3-5-2.ビブリオ属
    (1) 腸炎ビブリオ
    (2) 新たなキラー・バクテリア　バルニフィカス
  3-5-3.ブドウ糖非発酵（偏性好気性）グラム陰性桿菌
    (1) 緑膿菌とその類縁菌
  3-5-4.レジオネラ菌
  3-5-5.微好気性グラム陰性らせん菌
    (1) キャンピロバクター
    (2) ヘリコバクター・ピロリ
  3-5-6.マイコプラズマ
 3-6.環境中に見られる消毒薬耐性菌