原理やパラメータ・装置といった基礎から、移動相調製の留意点、試料調製と注入や分離・検出に関するノウハウ(分離の最適化、検出器の選び方・留意点等)、各種トラブルとその対処法などを、HPLC応用技術開発を専門とする講師が詳しく解説します。
第1部:知っておくべきHPLCの基礎
1.HPLCの原理と各種パラメーター
1.1 クロマトグラフィーとHPLC
1.2 クロマトグラムの読み方
1.3 基本パラメーターとその意味
(保持係数、理論段数、理論段相当高さ、シンメトリー係数、分離係数、分離度)
2.HPLCにおける分離モード
2.1 物質の極性(極性物質と非極性物質、強溶媒と弱溶媒)
2.2 吸着、分配(順相・逆相)、イオン交換、サイズ排除
3.HPLC装置の基礎
3.1 送液部(送液ポンプ、脱気装置)
3.2 試料導入部(オートサンプラー、マニュアルインジェクター)
3.3 分離部(カラム、充塡剤、カラムオーブン)
3.4 検出部(吸光光度検出器、蛍光検出器、示差屈折率検出器他)
第2部:現場で役立つ実践ノウハウ
1.移動相に関するノウハウ
1.1 水や有機溶媒、緩衝液の選び方
1.2 移動相調製の留意点(調製方法、脱気)
2.試料調製と注入に関するノウハウ
2.1 試料溶媒の選び方
2.2 試料前処理の基本
3.分離に関するノウハウ
3.1 逆相における分離の最適化(充塡剤、移動相、温度)
3.2 グラジエント溶離とその留意点
4.検出に関するノウハウ
4.1 検出器の選び方
4.2 誘導体化検出法
4.3 検出器の留意点(吸光光度検出器、蛍光検出器)
第3部:よくあるトラブルと対処のポイント
1.負荷圧の上昇
2.ノイズの増大とドリフト
3.保持時間の変動
4.ピーク面積の変動
5.不明ピークの出現
6.ピーク形状の異常
□ 質疑応答 □